【求助】southern blot 探针效率不够怎么破？
这个帖子发布于 11 年零 120 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好！
我第一次做southern blot，只有阳性对照（基因组DNA混入0.2ng转基因质粒）有微弱信号。有同学告诉我是探针效率不够，我重新合成探针，检测效率，发现效率还是很低。只有1ng/ul, 10pg/ul，和3pg/ul的点有信号可见。奇怪的是，roche kit II提供的control DNA也只能看到3个点。于是，我延长抗体孵育时间至过夜，发现结果一样。
control DNA不能做出多个点来，到底哪里出了问题呢？紫外交联吗？我是1200uJ,照射1min.
我第一次做southern blot，只有阳性对照（基因组DNA混入0.2ng转基因质粒）有微弱信号。有同学告诉我是探针效率不够，我重新合成探针，检测效率，发现效率还是很低。只有1ng/ul, 10pg/ul，和3pg/ul的点有信号可见。奇怪的是，roche kit II提供的control DNA也只能看到3个点。于是，我延长抗体孵育时间至过夜，发现结果一样。
control DNA不能做出多个点来，到底哪里出了问题呢？紫外交联吗？我是1200uJ,照射1min.
