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【求助】MS结果显示重组蛋白分子量大14是什么原因

发布于 2013-06-02 · 浏览 1620 · IP 安徽安徽
这个帖子发布于 11 年零 341 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

表达一个重组蛋白,LC-MS结果显示有一个靠的很近的杂质峰,分子量比目的蛋白分子量大14da,经过分离与酶切鉴定,能定位到是羧基端4个氨基酸肽段大14,四个氨基酸为CYNG,其中C和其他的C形成二硫键,分析可能出现大14的原因有:羧基端甲酯化、Y氧化、G错表达为A或者N错表达为Q(基因合成错误?突变?)、或者其他?各位高人有何见解?蛋白是包涵体表达(PET28/BL21表达系统),破壁后用胍或尿素溶解后检测就发现有大14杂质,怀疑表达出来后就有此修饰,工艺带入的可能性比较小。有人遇到过类似问题吗?或者怎么进一步鉴定修饰原因?希望有人指教,不胜感激!

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1620

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