【求助】免疫组化非特异或假阳性？

实验名称：组织免疫组化

一抗和二抗货号：Chicken polyclonal to beta III Tubulin(TUJ1一抗)和Goat polyclonal Secondary Antibody to Chicken Ig Y- H＆L(HRP)

实验材料：14天小鼠胚胎脑石蜡切片

实验步骤如下：

二甲苯1：15min

二甲苯2：15min

无水乙醇：二甲苯:10min

100%1:3min

100%2:3min

95%:3min

90%:3min

70%:3min

蒸馏水分:3min
抗原修复：柠檬酸钠缓冲液（PH6.0），把片子和缓冲液一起放放在电炉上蒸煮，温度达到90度后，继续煮10min分钟。

PBST（含0.1% Tween的）清洗3次: 5min/次

1%BSA+10%山羊血清封闭2h；

控干加一抗（1:400）4度过夜；

第二或第三天取出复温30min;

PBST浸洗5次: 5min/次；
加3%过氧化氢溶液20min；

PBST清洗3次: 5min/次；

加二抗（1:400或1：200）1h；

PBST清洗6次: 5min/次；

加DAB显色：时间不定以出现颜色为准。

封片观察。

问题是：感觉非特异性，也可能是假阳性去除不了！**指导，我是哪个步骤出错了？

一抗1:400,二抗：1:100

一抗：1:400，二抗：1:400