【求助】wb内参不一致，灰度值分析

1. 测完蛋白浓度，统一上样量，但是 跑了好多次了，wb的内参的灰度值总是不一致，这个是不是在一个范围内就可以认为是一致的呢？范围是多少？
2.内参灰度值不一致， 同一个孔跑出来的目的蛋白和内参（目的蛋白和内参分子量相差20k）的灰度值比较是不是可以作统计分析呢？我认为是可以的，但是同学说不可以。
请求各位指导