【求助】是二抗导致的背景高不？？
这个帖子发布于 14 年零 340 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请各位高手帮我指点指点：
最近做了两个蛋白的印记，一个actin 、一个目的蛋白
一抗 都是santa cruz的
二抗 皆是北京中衫 actin是羊抗兔、目的蛋白是兔抗山羊
两个蛋白是同时转膜（因为actin的条件没那么苛刻，就跟随目的同一块胶做了），同时抗体孵育，同时曝光，同时洗膜10min
结果，actin爆出来的条带非常漂亮，几乎没什么背景，而目的条带的膜就通体发亮，条带几乎看不到，想了好多方法去解决，没能爆出好看的条带，这两个蛋白，就是在二抗上不一样，难不成是 二抗的特异性不高
有没有这个可能？？
请做过的支招
最近做了两个蛋白的印记，一个actin 、一个目的蛋白
一抗 都是santa cruz的
二抗 皆是北京中衫 actin是羊抗兔、目的蛋白是兔抗山羊
两个蛋白是同时转膜（因为actin的条件没那么苛刻，就跟随目的同一块胶做了），同时抗体孵育，同时曝光，同时洗膜10min
结果，actin爆出来的条带非常漂亮，几乎没什么背景，而目的条带的膜就通体发亮，条带几乎看不到，想了好多方法去解决，没能爆出好看的条带，这两个蛋白，就是在二抗上不一样，难不成是 二抗的特异性不高
有没有这个可能？？
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