【求助】也是分离脐血单个核细胞的问题
郁闷了好久,为什么连续2个月分出来的脐血单个核细胞都是污染了,看到长条状的东西好像在动,周边又看点很多圆点点。后来一步一步排除,我个人真的觉得不像是污染,更加像是我分出来的单个核细胞碎片。
分离脐血单个核细胞的步骤如下:
1 用血袋收集脐血,取40ml血与6%HES充分混匀后静置1小时(6%HES是我自己用纷配的,不知道有没问题)
2 取非红细胞层,直接按1:2的比例加到FICOLL上(用的是上海试剂二厂的)
3 取白膜层
4 PBS洗涤2次
细胞数目是不少,但是肉眼看已经看到白色一粒粒的细胞团怎么吹也吹不散,镜下看这些细胞团都是周围很多碎片,培养几小时后碎片就散开在整个培养瓶了,但还会有少许细胞团。这样培养的细胞过几天就挂了。我晕啊。
想各位大侠帮忙分析下原因。我师兄说会不会是渗透压的问题。
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2858