原代神经元培养
发布于 2021-04-11 · 浏览 9519 · IP 上海上海
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最近在学习原代神经元培养，具体参考了一些经典protocol和@holywater大神的帖子，但还是遇到以下问题，希望大神指点。
1.我用的是E18.5孕鼠，胎鼠解剖出大脑组织后，如何寻找海马，本人最后解剖出两个大脑半球，但依旧分辨不出海马在哪，只好把大概位置的脑组织取下来当做海马用。
2.光镜下如何分辨神经元和胶质细胞，我只能大概确定有一根很长的轴突的是神经元，那是不是其他的有很多突起的细胞就是胶质细胞。以下是6孔板内神经元和胶质的照片（d4），不知道我的理解正不正确。然后第二张图的三角形状的细胞是不是肌肉细胞（由于操作失误，我把胚胎的舌头混入了其中）
3.我采用的是Neurobasal+L-glutamine+半量双抗无血清培养基，由于操作能力不行，无法获得高浓度神经元，之前holywater大神提到的optiprep感觉有点贵，不知道有没有什么便宜的替代品。如果以上都没有的话，是不是应该加阿糖胞苷（我看很多人都不加）抑制胶质生长。
4.由于实验原因，我必须在96孔板内培养神经元，但我发现96孔板培养神经元的状态似乎确实不如6孔板，神经元长出轴突的比例变少了，然后由于木瓜蛋白酶用完了（没有用dnase），我用的0.125%的胰酶消化10min，可能长势不好也和这次消化有关。96孔板培养神经元有啥要注意的地方吗？以下为96孔板神经元图（d3）
5.目前市面上有永生化小鼠海马神经元HT-22，这个细胞系相比提取的原代神经元效果如何，国际上承认这个细胞系吗？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 9519
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