【求助】流式分选后,检测凋亡!?
由于,脂质体转染L02细胞,效率只有百分之20多. 转染后,做凋亡检测,可能差异不明显!!! 因此,想用流式分选出一定量的荧光阳性CELL(表达的是GFP的融合蛋白), 再做检测!
之前,并未做过这类实验,再加费用也不便宜.先请教一下各位,这样去做的话,是否可行呢???
我想了一下,至少有两个问题待解决: 20%转染效率+分选中还有破碎的CELL,如果要筛选出一定量的细胞做凋亡与WESTEN 检测,这个所需的阳性细胞量能否达到(由于,一个小时800元,不太可能选几个小时,但是,我有四个转染的样品,最好能一个小时内完成); 在分选后,接着双标染色上流式检测凋亡, 理论上可行否,我查了一下,好象分选后测凋亡的并不多!!!!!
请大家给点意见!谢谢