求助!!!基因敲除小鼠的鉴定
最后编辑于 2022-10-09 · IP 上海上海
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我们刚从国外购回了一批基因敲除的杂合子小鼠。敲除的部位是该基因的exon3。我们在exon3附近设计一对引物,理论上野生型小鼠应该可以拉出一条900bp的条带,杂合子小鼠可以分别拉出900(正常)和200bp(敲除)的两条条带。
但实际情况是杂合子小鼠只能拉出200bp的条带,即使把野生型小鼠和杂合子小鼠的基因组混合仍只能拉出200bp的条带,试过延长退火温度到1min,或增加循环次数到40,仍拉不出900bp的条带,像这样的情况应该从那些方面优化条件呢
请各位多多指教!!!