蛋白表达不出来

重组表达一种蛋白，１４ｋＤａ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示在１４ｋＤａ处有一浓的条带，可能是目的蛋白，Ｎｉ柱亲和纯化怎么也出不来，后来想在裂解菌时加了溶菌酶（分子量也为１４ｋＤａ左右），是不是它产生的干扰呢。后来我做了鉴定：
１.那条带到底是溶菌酶还是目的蛋白，不加溶菌酶看看还有没有这条带，结果是条带很很弱，几乎没有。
２.作菌斑ＰＣＲ看看还有没目的基因，结果能扩增到目的基因，目的基因还在。
我是接着别人做的，蛋白拿不到，我十分郁闷，都快急死了，到底是什么原因呢，是不是宿主菌中含的质粒很少，所以表达很低很低呢？需要重新转化还是重新构建？请高手帮忙！