【求助】如何做大分子蛋白的western？
这个帖子发布于 18 年零 237 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我最近在做100kDa和160kDa的蛋白western，用的是多抗。
但是发现western的结果目标条带不明显，但是杂带都已经很亮了，压久了背景都挺亮了，但是目标条带还是比较虚比较淡，不像内参压得那么结实漂亮。
不知道该怎么改进，是加大上样量吗？
还是加大一抗二抗比例呢？
那背景会不会变得更脏了呢？
我现在的转膜时间已经加到200mA 3个小时，应该够了
请指教
但是发现western的结果目标条带不明显，但是杂带都已经很亮了，压久了背景都挺亮了，但是目标条带还是比较虚比较淡，不像内参压得那么结实漂亮。
不知道该怎么改进，是加大上样量吗？
还是加大一抗二抗比例呢？
那背景会不会变得更脏了呢？
我现在的转膜时间已经加到200mA 3个小时，应该够了
请指教
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