胆红素很高但酶却负值？（三）

在介绍完生化反应曲线的基础理论和常用检测方法以及介绍一下几种检测方法的曲线图后，回到最初的问题，胆红素很高但酶却正常的问题。还是先看检查结果如下图，这次的结果略有不同，酶的结果是负值。

患者男，64岁，因反复喘促胸闷2年余，加重半月入院。之前曾诊断患有肺心病，心衰，冠心病。查看反应曲线如下图所示（以AST为例）。

AST的检测方法是速率法，通过反应曲线和结合查看仪器后发现这种情况是AST的活性非常大，底物在反应读取之前就已经耗尽，仪器给的结果跟真实值差距非常大。出现这种情况时，检测值会跟其他项目有明显矛盾，结果也跟临床表现天壤之别，而且大部分仪器会有报警信息，因此这种情况，检验人员一般都可以发现异常并及时纠正，通常的做法是对标本进行稀释，但稀释倍数如果不对，可能会得到差别很大的结果。针对上述结果，在查看病例和历史结果后，选择10倍稀释，在无法确定的时候建议大家从低倍数开始稀释。下图是这份标本稀释后的结果和反应曲线：

这是一例出现负值，大家一定会去复查的，但是实际工作中会出现酶结果正常，胆红素高的情况，就像之前帖子里那样，在审核报告时稍有不注意，就很容易给临床带来误诊，以为治疗无效而且反而肝炎加重了。另一方面，由于高胆红素，低转氨酶的肝功能报告，很容易给临床医生“胆酶分离”的假象，使医生在评估病情时出现误诊。

正常反应曲线的特点：

1、比较平滑，无明显的跳点;

2、加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度样本除外);

3、终点法的反应曲线，会有一段曲线的吸光度基本无变化;

4、速率法的反应曲线，基本成一条直线(两点速率法除外)。

异常反应曲线的特点

1、结果出现负值(终点法项目):反应曲线有可能是一条直线，样本或R2有可能没有加入;R2加入之前的吸光度比加入后还高，试剂1和试剂2位置放反或者严重脂血标本。

2、结果明显偏低(速率法项目):反应曲线出现平台期，反应曲线可能变成了类似于终点法的曲线，也就是我们通常说的底物耗尽，需要稀释重测。

如何避免底物耗尽带来的误差？

在审核报告时，既要综合考虑整张报告单各个项目的结果，对有疑问或者矛盾的项目结果，还要查看反应曲线，并及时与临床医生沟通，结合病人的情况评估检测报告是否存在偏差。此外可以借助生化仪上面自带的参数设置，设置好底物耗尽的相关参数，让仪器自动报警。

由于不同厂家的仪器所给定的参数不同，底物耗尽的参数大概分两种：

1. 线性度：一般厂家设定的线性度为 15%，其含义就是所有检测点的 O D 值与理想拟合曲线的线性相关度要在 15 % 之内，超出这个范围就是超限，仪器对此结果就会报警。个人意见，15% 的线性度有些大，最好设置在 10% 以内，以保证结果的准确性。

2. 吸光度限值或者反应界限：也就是单位时间内吸光度的变化（上升或下降）不能超过多少，或者初始反应的曲线斜率不能超过多少，以保证在读取反应阶段的吸光度结束前，底物都还是充足的。但由于这个参数的设置跟底物的量，反应阶段开始和结束的时间设定等都有关系，因此这个参数没有定值，厂家一般不会给这个参数值（除非是封闭系统），因此如果要设置这个参数，需要检验人员自己用一个最大线性左右的样品，通过这个样品的吸光度变化来计算这个参数。