构三个敲低质粒只成功一个是什么原因呢？
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花匠是自己 推荐用sigma构了三个敲低的质粒，blast验证了，构成功之后测序比对成功了，重新用dh5α转化，摇菌扩增质粒，用293T包病毒，用病毒液转染质粒，其中用带荧光的质粒检测转染效率达80%，结果做实时荧光定量pcr检测出来只有一个质粒有敲低的效果，这是怎么回事？难道是我重新转化时挑的菌落有问题，还是因为摇菌的时候，摇到一半机器停了第二天我才发现然后继续摇的原因，还是因为转染没成功啊？跪求大神指导，忙活了一个月，结果成这样真的很崩溃啊！！！！
最后编辑于 2023-04-06 · 浏览 645
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