蛋白质银染
原理：银染一种是检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其原理是银离子在碱性 pH 环境下被还原成金属银，沉淀在蛋白质的表面上显色。银染的方法种类很多，有文献报道的就有 100 多种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。由于银染的灵敏度很高，可染出胶上低于 1ng 的蛋白质点，故广泛地用在 2D 凝胶分析上，及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。
应用：主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测，如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究 。
步骤:
IP（略）
WB SDS-page胶电泳（略）（可以购买商品化的梯度胶，跑出来效果会好很多）
银染：
使用试剂盒：Pierce Silver Stain Kit (Thermo)
自备:乙醇,醋酸,超纯水、干净的平皿
注意事项：
1、所有步骤中液体必须完全覆盖page 胶，
2、避免使用金属器械,用手套只能触摸胶的边缘,避免形成背景。
3、固定液、终止液、乙醇可以提前配置,其他溶液最好现配现用。
4、电泳结束后截去多余的部分，将胶剥出，浸泡于盛有ddwater 的平皿中
实验步骤
1、ddwater:2 times x 5min
2、30% alcohol：10%醋酸 固定2x 15min(可过夜）
3、10%alcohol：2 times x 5min →ddwater 2 times x 5min
4、备敏化工作液1：500 （即50ul sensitizer with 25ml H2O)
5、敏化1min→ddwater 2 times x1min
6、备银染工作液：1：50（即0.5ml enhancer with 25ml stain)
7、银染30min(可过夜）
8、备显影液：1：100 （即0.25ml enhancer with 25ml developer) 比例可以根据情况调整
备终止液：5%乙酸（醋酸） with ddwater
9、弃银染工作液，加ddwater 2 times x 20s
加显色液2-3min,待条带出现，IgG显色，视显色情况可调整显影液enhancer的量
10、条带出现后弃去显影液，加终止液，更换一次终止液，换ddwater
11、Scan
