DNA凝胶回收与实用问题解答

DNA凝胶回收是从电泳后的凝胶中回收目的DNA的过程，其目的是将目标DNA重新利用，也是我们在进行生物领域实验中最常用的实验方法之一。

DNA凝胶回收实验现在基本上都是采用试剂盒的方式来进行操作，而试剂盒一般是采用吸附材料结合的方法去除杂质和纯化DNA片段。目前大多数生物公司都采用硅基质吸附材料，可以特异性吸附核酸DNA，有效去除体系中的蛋白、盐类和有机物质，最后在洗脱液条件下被洗脱，从而达到核酸纯化回收的目的。

3.回收后的片段无法用于后续实验，如连接等

1)洗脱产物含有残留的乙醇。洗脱时硅胶膜或硅胶树脂上有漂洗缓冲液残留，会使洗脱产物中含有乙醇，影响下游操作。请确保彻底去除漂洗缓冲液，在洗脱前可通过再次离心或置于50℃烤箱中5-10分钟；

2)洗出液中污染有琼脂糖。凝胶未全部溶解；

3)洗脱产物含有ssDNA，表现为在琼

脂糖电泳上呈小弥散带。将洗脱产物95℃加热2 min,慢慢冷却到室温，使单链DNA重新退火复性即可。

4.洗脱注意事项

1)洗脱体积越大，洗脱得率越高。若需得到较高浓度的DNA，可以适当减少洗脱体积，但最小体积应不少于25 µL，体积过小会降低DNA洗脱得率， 降低产量。

2）电泳图及切胶块的实例图

3)回收产物