qpcr 扩增曲线异常

各位大佬们，请教下，请问这个扩增曲线前面有个拱门是为什么呀，有什么办法吗，熔解曲线是完美的单峰。ct也才27.28。

之前没有这种情况，有一天突然出现了，之后就一直有，但是我看有的师姐就没有出现过。一开始以为是qpcr体系没有混匀，现在我一般都是离心2min才上机，可是还是没有避免。

并且，之前上样，一块板可能最多两个质量问题，自从出了这个情况，一块板好多质量问题，有时候复孔ct能高达1-2，说明表达量相差2-4倍，我想，我再怎么操作不好，也不可能相差4倍啊，并且我要是打不干净都会回吸再打进去，确保打干净的。

拜托各位大佬们分析分析，小弟在这磕头了，可以有偿，实在想不出办法了。