Wb‖电流篇（1）很重要，必看！

很多人把western blot看成了玄学，我觉得大多数人没有用学会去总结，总是按着原来师兄师姐的步骤来，所以把wb想着很难很难，其实你仔细想想为啥wb难？其他实验简单，因为其他实验步骤比较，没有操作技巧，没有细节，照葫芦画瓢，就行！

这次我讲讲wb的电流部分吧，其实要想做好wb必须要看电流，每一个高手也是这样做的。我这次分以下部分来讲吧，讲的对错，只做一个参考，欢迎指正！

一:概述

1:下图是电泳仪，牌子啥的没有区别，可能就是功能多了一两个而已，不管啥牌子的，只要能控制恒压恒流时间的电泳仪都是好的电泳仪

2:关于电流的认知。

其实电流的大小反而会影响了体系的温度，就是说温度与电流大小成正比，那电压呢？也能，但是不直观。

所以我选择将电流作为金标准！

二:电泳

一般实验室的操作，无非就是先80v电压等marker分开再来120v电泳，然后就等电泳结束。你别抬杠，你说……，其实就是换汤不换药，都一样的，改了改时间电流电压啥的呗。

上面诸如此类，都是你的师兄师姐教的，他们的实验记录本也是这样写的，所以你操作的时候，你也会觉得没毛病，其实大错特错。

那你喜欢这样不动脑子的，我就给你总结了一套理论，不好看，你来找我！

1:电泳过程，电流在降低，降低比较缓慢

（如果快速掉电流，说明你的电泳槽的板没有形成密闭体系，你的电泳液从那个漏到了电泳槽里面，赶紧停了，重新组装）

2开始跑电泳，我设定恒压80v进行跑，我这时候立马观察这时候的电流，这个电流多大，如果说>55ma，或者＜30ma，我讲他定义为过大或者过小，啥问题呢？为啥这么大，亲，你该换换电泳液了，别在用了，次数多了，亲你说你的课题组穷，好吧，我也穷，怎么办？

这时候，用恒流45-55之间都可以，我一般喜欢用45恒流跑，直到我结束电泳操作，有人问这样不会有问题吗？我用我n多次成功告诉你，没问题，尽管来！

3:我跑80v但是电流一直降，marker没分开呢，到了过小了，我该怎么办，这时我直接调到120v，再看电流大小，如果还是小了的话，重复2的操作即可

4:我Marker分开了，现在加压到120v跑电泳，如果电流合适，就接着跑直到结束，如果不合适，按2操作即可。

转膜篇下篇再讲…