Wb条带、背景问题详解

抛开这个条带不好看之外，我们先说说这个白点出现的原因吧！

这是由于吸水纸操作不当造成！

什么意思？

一般我们敷完二抗都要把多余的显影液吸掉（不然会造成背景太亮，影响灰度分析，条带跑的效果也不好看），而吸掉多余显影液，我们是采取如图点对面接触吸掉，也就是膜的一个点去碰吸水纸的一个面，然而如果出现面对面的接触，就会出现如一图所示

为啥会出现上述图一白点现象呢？

就是因为吸水纸坑坑洼洼（图三可见），他和膜接触如果面对面，他的凸起部分会相对过多吸掉显影液，相对就是会有白点了，，所以你废了吗？

再来第二个问题？

出现上述的问题怎么解决啊？背景脏，然后你又会发现条带不清楚！

个人推荐从以下角度分析：

1： 转膜

转膜效率不高，导致目标区域不够亮！效率不高就要看你的条件了啊

2：蛋白样品

蛋白浓度不够啊，所以不够强啊

3：tbst洗及抗体、牛奶封闭

有颜色有背景就是因为有染料(ecl)，而我们对他进行多余部分吸出，就不会是因为ecl物理累计引起的（我一般喜欢把非抗原抗体结合引起的发光叫做物理累计，抗原抗体结合引起的我叫化学累计，个人习惯而已），那么就是因为化学累计。就是二抗的问题？二抗的话，分两种，还是物理和化学，物理悬挂或者粘附在上面的话，我们加大一下tbst的洗时间，化学的话就是因为一抗的问题，一抗的话说明覆盖太多，杂位点比较多，原因有两个：1牛奶封闭不行，所以一抗物理性结合在膜上，tbst洗也没作用导致的原因 2一抗特异性不行，你是不是用的次数太多了，比例比较高了，要找找问题。