单链抗体scFv扩增,拼接,电转建库后挑取单克隆检测,发现序列多是错的
从小鼠单克隆杂交瘤细胞中提取RNA,反转录成cDNA,以此cDNA为模板,扩增VH及VL,然后拼接成scFv,制作感受态细胞,然后电转进入感受态细胞建库,从此库中挑取单克隆送测序,序列分析发现,所得的克隆并不是三联体,无法正确翻译成单链抗体,序列正确率很低,想请教下这个什么原因?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1543
从小鼠单克隆杂交瘤细胞中提取RNA,反转录成cDNA,以此cDNA为模板,扩增VH及VL,然后拼接成scFv,制作感受态细胞,然后电转进入感受态细胞建库,从此库中挑取单克隆送测序,序列分析发现,所得的克隆并不是三联体,无法正确翻译成单链抗体,序列正确率很低,想请教下这个什么原因?
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