质谱技术来抓菌？受不了，太快了

以下摘自检验医学

“某”案例：

患者某，男，36岁，于11月2日到本院脑外科就诊头颅脓肿，发热待查，小赵医生对其进行切开排脓手术，体温仍不能下降至正常。医生考虑为细菌性感染，取伤口分泌物并立即送至检验科微生物室进行检验。

在此期间，小赵医生多次与检验科沟通，得到的回复是“等”！

家属来咨询用药情况，小赵医生无奈地说：我也在等待药敏结果！

经过一天的等待，小赵医生接到了检验科的电话：

经验用药没有达到预期效果，小赵医生无助地再次咨询药敏结果...

然而，患者病情在逐渐的恶化......这在某种意义上，是整个检验行业的一种悲哀。

临床微生物学检验的目的，是为临床提供及时、准确的病原体检验证据和指导感染性疾病的诊治。细菌的鉴定方法包括血清学鉴定、生化鉴定、全自动鉴定仪、核酸检测、质谱技术等。

细菌鉴定是细菌分类的实验过程，目前使用的传统方法虽然实现了自动化，满足了临床的部分需求，但仍存在着一些缺点，如检测时间长，检测结果不够精确等问题。

这时，质谱仪的出现,就大大加快了细菌鉴定的进程！

“质谱”，就是把化合物分子用一定的方式裂解后生成各种离子，按其质量大小排列而形成的图谱，通俗的来说，质谱仪就是一个离子质荷的一个天平。

MALDI-TOFMS基质辅助激光解析电离飞行质谱仪是由进样系统、离子源、质量分析器、离子检测器几部分组成，进入数据处理系统从而形成谱图。

鉴定依据为菌体内高丰富、持续表达蛋白（核糖体蛋白）的质谱指纹图及其重现性，数据处理系统相当于菌种的大数据库，对于检测的样本可以在数秒钟匹配数据库中的细菌图谱。

操作流程简单，快速，有多快？

有多简便？

质谱的鉴定结果以分数的形式表示，分数为0-10分。

（得分区间为[9.5,10.0]）：则该匹配结果种水平可信，可能的亚种；

（得分区间为[9.0,9.5]）：则该匹配结果种水平可信；

（得分区间为[6.0,9.0]）：则该匹配结果属水平可信，种水平参考；

（得分区间为[0.0,6.0]）：则该匹配结果不可信，仅供参考。

1.真高分值：

细菌鉴定得分在9.0以上，丝状真菌得分在6.0以上，且鉴定结果明细较一致。

2.假高分值：

菌株鉴定得分较高，但鉴定结果明细一致性较低，主要由于有些菌株蛋白指纹图谱特征峰非常相似，从而无法区分的菌株，如大肠与志贺、阴沟肠杆菌与阿氏肠杆菌等，用户可根据有无临床意义判断是否有必要用补充实验做进一步验证。

3.假低分值：

细菌得分区间在9.0以下，丝状真菌得分区间6.0以下，如一些难破壁菌株，丝状真菌、革兰阳性杆菌等，鉴定结果明细里10个结果一致性较高，则种/属水平可信。

4.真低分值：

原因可能有混合菌、蛋白图谱特征峰缺失或峰数量过多或过少，造成谱图峰与标准库中谱图多种菌匹配；或数据库中没有收录该菌，一般鉴定结果为，少数菌可能由于与其他近似菌匹配。

质谱仪其他优势：

提高各种菌群的鉴定能力，提高厌氧菌的鉴定能力、提高苛养菌的检出率、提高不典型菌、丝状真菌、奴卡菌、分枝杆菌的鉴定能力等，在细菌耐药性检测中也具有很强的指导作用，MIRSA鉴别及分型、VRE鉴别及分型、ESBL检测、碳青霉烯酶检测、多粘菌素耐药检测、利奈唑胺耐药检测等。

质谱仪的劣势：

对于亲缘性较近、蛋白指纹图谱相似的菌株，通过质谱学方法较难区分。

需血清学验证的菌种 需进一步确认菌种

大肠埃希氏菌O157 烟曲霉

肠沙门菌亚利桑那亚种 大肠埃希氏菌

沙门菌群

志贺菌群 /

大肠埃希菌与志贺菌

链球菌属：肺炎链球菌、缓症链球菌、副血链球菌、口腔链球菌。

阴沟肠杆菌属复合群：阴沟肠杆菌、阿氏肠杆菌、神户肠杆菌、路氏肠球菌。

巴斯德菌属：多杀巴斯德、口腔巴斯德。

“质谱”，对临床微生物实验室的最大贡献，其一是速度，平均1分钟完成1-2菌株鉴定。其二，是菌谱，>1000种（包含丝状真菌、厌氧菌、奴卡氏菌、分枝杆菌等等。）其三，就是成本低，包括时间成本和经济成本，甚至是许多重症感染患者救命的福音。

质谱仪的出现将会逐渐改变现有的诊断模式，其简便、快速、精确的优势必将得到临床及检验工作者的一致认可。

新的细菌及真菌鉴定模式的诞生,是多么令人兴奋的消息啊！