带MBP标签的蛋白纯化
我目前在蛋白纯化时遇到了一些困难,请教各位一些问题,我的标签是His+MBP 的,但时之前试过两种柱子(MBP和NI柱)特异性都不好,每次都有很多杂蛋白,在洗脱当中就存在单独的标签带,并且由于我的蛋白分子量约16KD,酶切完之后MBP条带非常明显,但是我的目标条带却几乎看不到,再次结合柱子去标签也没有办法完全去除,浓缩之后杂蛋白的量几乎比目标蛋白还多,过分子筛也不管用。想请教一下我酶切过后需不需要先透析再结合柱子去标签,有没有什么办法使其特异性好一些呢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2641