体外细胞传代
体外培养细胞的传代
1. 贴壁型(大多数)
胰液消化
弃培养液,PBS洗涤
加0.25%胰蛋白酶液,以没过细胞最佳,37度保温箱置两分钟
显微镜动态监测(胞质回缩,细胞呈圆形即可)
弃胰液,加培养液终止消化,吹打混匀成悬液继续培养
2.悬浮性(少数,如白血病和淋巴瘤细胞)
A离心法传代:1000转/分,5分钟,弃上清,细胞沉淀新加培养液后轻轻吹打混匀继续培养
B直接传代法:悬浮细胞沉淀于瓶壁,弃1/2到2/3培养液,吹打混匀成悬液继续培养
注:严格无菌操作
体外培养细胞的传代
1. 贴壁型(大多数)
胰液消化
弃培养液,PBS洗涤
加0.25%胰蛋白酶液,以没过细胞最佳,37度保温箱置两分钟
显微镜动态监测(胞质回缩,细胞呈圆形即可)
弃胰液,加培养液终止消化,吹打混匀成悬液继续培养
2.悬浮性(少数,如白血病和淋巴瘤细胞)
A离心法传代:1000转/分,5分钟,弃上清,细胞沉淀新加培养液后轻轻吹打混匀继续培养
B直接传代法:悬浮细胞沉淀于瓶壁,弃1/2到2/3培养液,吹打混匀成悬液继续培养
注:严格无菌操作