初次养牙髓干细胞,愿前辈多来指导
第0天:健康无龋坏的第三磨牙,离体后尽快磨成下图,泡含双抗的PBS溶液,移入生物安全柜。

含双抗的PBS 溶液洗3遍后,掰断,挑出牙髓组织,PBS再洗3遍,牙髓组织剪碎成很小的小粒状,入离心管,I型胶原酶co2孵箱内37℃ 消化2h,偶尔不定时拿出来摇晃几下。(文献推荐两种酶消化1h,每5-10分钟摇晃)

第1个24h后(第1天),见组织块和很少的细胞贴壁;第3天换液,星星点点的细胞;第5天,如下两张图,稀疏的细胞和少数几处组织块周围爬出的细胞。

第5天组织块周围:

间隔3天换液体,第12天的时候像上面一样细胞分布不均匀,有的呈集落,有的很稀疏,当时只是继续换液。下面两张是第16天了。


长这样,胰酶消化传代。
第一次接触细胞培养,团队里也没有相同的细胞培养经验。 前辈们,对于以上诸多时机和方法不当之处,帮忙指导下,感激!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4455