求助:包含体蛋白复性后沉淀
最近在做重组蛋白的实验,我已经用Ni柱纯化到了重组蛋白,目前在复性的过程中出现了问题,我用的复性梯度尿素是6M 5M 4M 3M 2M 0M 我发现在4M时便出现了沉淀,而且之后沉淀析出的越来越多,最后我离心收集的沉淀,用6M的尿素才重新溶解了,现在有两个问题:
1,如何避免出现沉淀,我试过加甘油了,不好使……
2,我重新溶解的重组蛋白,可不可以用来免疫兔子制备多抗呢?
希望得到大家的解答,感激
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1181
最近在做重组蛋白的实验,我已经用Ni柱纯化到了重组蛋白,目前在复性的过程中出现了问题,我用的复性梯度尿素是6M 5M 4M 3M 2M 0M 我发现在4M时便出现了沉淀,而且之后沉淀析出的越来越多,最后我离心收集的沉淀,用6M的尿素才重新溶解了,现在有两个问题:
1,如何避免出现沉淀,我试过加甘油了,不好使……
2,我重新溶解的重组蛋白,可不可以用来免疫兔子制备多抗呢?
希望得到大家的解答,感激
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