应用水合氯醛麻醉裸鼠的经验分享
本人要在裸鼠皮下移植一个材料,操作简单,就是切开-植入-缝合,熟悉的话,只许10分钟左右。涉及到麻醉,做实验之前便在园子里逛了下,针对我的实验,我觉得最佳麻醉时间30min妥妥够了,但是看了好多帖子,都没找到合适的麻药和浓度。
首先,我所在的动物房免费提供10%水合氯醛(如图),但我也听说这个不好过伦理、发文章也可能受阻,所以我最先是买了戊巴比妥钠的。但后来看到说戊巴比妥钠麻醉大鼠、兔子这些还好,裸鼠太小,有效剂量和致死剂量太接近,量不好掌控,于是迟迟不敢用。鉴于动物房对水合氯醛使用率最高,经验比较丰富,对我来说是最方便的,动物房老师推荐10%水合氯醛300-400ul/100g ,建议我就打最小剂量就行,我不放心,就粗粗拿其他同学废裸鼠做了个预实验。
1、裸鼠称重,6-8周裸鼠,平均20g/只
2、将10%水合氯醛用生理盐水稀释至2%,即4ml 10%水合氯醛加入16ml 生理盐水。
3、计算用量:300-400ul/100g 10%水合氯醛相当于300-400ul/20g 2%水合氯醛。
可以看到,我之所以选择10%稀释到2%,是因为好计算啊。如果不稀释也行,就是60-80ul/20g嘛,但实验室现有的针筒最小的也只有1ml的,60-80ul实在很难控制,除非你有微量注射器。稀释成2%后,每只裸鼠300-400ul(0.3-0.4ml)的量用1ml针就很好打了。
4、我按300ul/20g、350ul/20g、400ul/20g、450ul/20g分别打了4只裸鼠
观察到的结果是:每只都差不多2-3分钟进入麻醉;
300ul/20g的裸鼠一直半睡半醒,偶尔还爬动;
350ul/20g和400ul/20g的裸鼠进入麻醉后呼吸匀畅,40min左右醒来;
450ul/20g的裸鼠时而有抽搐,大约60min醒来。
所以我最后选择打350-400ul/20g,实验进行得很顺利,由于裸鼠体重的差异,大多在30min-60min安全醒来。
由于我还买了戊巴比妥钠的粉末没用,期待用过的分享一下经验呀,我主要做裸鼠。
最后编辑于 2019-05-29 · 浏览 3.5 万