干货-病理量化分析经验共享！

很多老师不知道有没有苦于做了染色不知道怎么分析的。

今天我就给大家带来关于病理量化分析的细节和步骤。如果大家感兴趣，我会持续更新的。

1.       检查仪器与工具

用到的仪器是正置白光拍照显微镜，正置荧光拍照显微镜，倒置荧光拍照显微镜，数码相机

2.       测量与分析软件

3.       病理染色量化分析项目内容：l 测量各类结构长、宽、面积、数量或者密度；

Ø 测量累积光密度（IOD）或者面密度（IOD/待测区域面积）：累积光密度值是所有阳性信号光密度的积分，包括阳性信号的强度和面积；

Ø 测量阳性率（阳性细胞数/总细胞数），阳性细胞密度（阳性细胞数/待测区域面积）或者阳性面积比（阳性面积/待测区域总面积）；

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4.       测量方法：

Ø 测量距离（长、宽、高、厚度）方法

Ø 测量面积方法：

注：测量长度时也可以先校正标尺然后使用测量工具，可直接测出实际长度。

l Image-pro plus测量面积、数目、IOD等：

Ø 设置像素对照（针对白光照片：免疫组化，化学染色等）：

Ø 转换荧光图：

Ø 选择测量项目：

Ø 荧光图测量Count：

Ø 测量白光图：

Ø 精准测量数目：

注：image-pro plus测量数目时，阳性连成一片的会记录为1个，阳性不连续的会记录成N ，所以在测量数目时不太精确。ImageJ 测数目相当于人工计数，测量精准，但对于阳性密集的图比较费时费力。

5.       测量数据初步处理：

初步处理数据

如：调亡率=tunel阳性表达数目÷总核数×100%

  Masson蓝色胶原百分比CVF%=蓝色胶原面积÷总面积×100%

微血管密度MVD=微血管数目÷面积

 

6.       测量数据进行统计学分析，最后结果以Excel表格呈现：

 

以小肠黏膜损伤Chiu’s分级评分量化统计为例：（数据充分以及有统计学意义，最终结果会以excel表格呈现：表格1原始数据，表格2数据与图表，表格3 SPSS数据）

小肠绒毛损伤评分量化结果数据结果（原始数据）：

小肠绒毛损伤评分量化统计（数据与图表）：

根据以上数据利用统计学软件SPSS v19进行单因素方差分析（SPSS数据）

7.       注意事项：

（1）   分析前尽量提供分析相关文献、分组信息、实验背景及目的；

（2）   样本数目会影响是否能进行后续的数据分析；

（3）   待测图片倍数选择以更好测量阳性信号为主。