HEK293细胞的悬浮驯化

大家看看我这个实验步骤正不正确

1.开始在培养皿中，用10%FBS＋DMEM

2.依然在培养皿中，逐渐按照FBS的递减梯度浓度，在6孔板中筛选稳定株

3，在FBS到1%或2%时，开始上2L转瓶。用胰酶消化后，将消化后的细胞加入转瓶，加入培养基（一开始需要加多少毫升培养基？？？）

4，转瓶换液则是，将转瓶中的液体倒出来，离心后，去掉旧培养基，新培养基把细胞重悬，倒回转瓶。