（求助）细胞双染免疫荧光时为什么两种荧光完全重叠？
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我做细胞免疫荧光同时观察两种蛋白，两种蛋白都表达于细胞浆内质网。需要用两种荧光抗体。一个是间接法，加羊抗人一抗后，再加Cy3标记的兔抗羊二抗；另一个是直接法，为FITC标记的鼠来源抗体。结果在不同的滤镜下观察，两种荧光同时出现在胞浆且完全重叠。无论先加哪个抗体，结果都是重叠。而单独用一种抗体染色证实都有表达
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我做细胞免疫荧光同时观察两种蛋白，两种蛋白都表达于细胞浆内质网。需要用两种荧光抗体。一个是间接法，加羊抗人一抗后，再加Cy3标记的兔抗羊二抗；另一个是直接法，为FITC标记的鼠来源抗体。结果在不同的滤镜下观察，两种荧光同时出现在胞浆且完全重叠。无论先加哪个抗体，结果都是重叠。而单独用一种抗体染色证实都有表达
