人iPSC传代后贴壁，第二天大量死亡

我养的人iPSC，复苏后生长良好，一般6天左右可以传代；传代用的Accutase，消化成块状后传代，加入Y，用Matrigel（1:50-60稀释）包被，mTeSR1培养基；传代后1小时左右细胞90%贴壁，但是到了第二天就大量死亡，越养越差，不知道怎么回事，去年10月份之前养得很好，后面就开始反复出现这种情况，检测过支原体，没有污染。请问可能的原因是什么？求大神指导，已接近崩溃边缘，请及时抢救。