质粒转染为何细胞死亡严重？
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我的实验目的研究目的蛋白过表达或敲减后对细胞功能的影响，其中一项是对细胞凋亡的作用，我采用lipo3000转染过表达质粒的方法。
我将实验分成五组：
scramble-si
si-目的蛋白
空质粒过表达
目的基因质粒过表达
Mock
结果发现虽然第4组目的蛋白的过表达可引起明显的细胞凋亡/死亡（FITC/PI流式细胞术)，但空质粒也同样可增加细胞的凋亡/死亡。后来在转其他质粒的过程中发现质粒转染均会造成不同程度的细胞凋亡/死亡，这让我研究目的蛋白与细胞凋亡关系时变得复杂。
问题：
质粒转染是否均存在细胞死亡？我的空质粒转染组凋亡+死亡的细胞也能够达到10%~20%，而过表达目的蛋白组能够达到20-30%是否能够说明目的蛋白有促凋亡作用？
我在研究过表达质粒对细胞增殖，迁徙的影响时，如何能够排除细胞死亡对增殖，迁徙的影响，因为细胞死亡过多，细胞的增殖及能够迁徙的细胞自然减少了。
凋亡抑制剂z-vad-fmk的加药时间一般怎么选择，用药时间多久啊？
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