肝脏组织蛋白的提取
这个帖子发布于 9 年零 36 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
肝脏蛋白用BCA法定量非常高，但跑western 连内参（β-actin）都很淡，不知道问题出在哪一个方面。
我用小鼠的肝脏提取蛋白，
组织先放在液氮里，然后放在-80度，之后要提取的时候，用机械法匀浆（用的是加入了磷酸酶、蛋白酶抑制剂以及PMSF的RIPA裂解液），匀浆后细胞裂解叫彻底。离心后显示沉淀很少。
然后BCA法测定蛋白的浓度是非常高的，但是跑western的时候连内参β-actin都很淡，我不知道该怎么办了。
大家有没有过类似的经历，然后如何解决这个问题的？ 谢谢帮助！
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