【求助】请问如何提取小鼠脂肪组织

求各路大神指教从小鼠中提取脂肪组织的方法。

以下是我搜到的三种方法，仍有细节问题，希望大神解答。

一、1.100mg猪脂肪组织加1 ml裂解液,匀浆;
        2.匀浆液加5ml抽提液,4度放置1小时;
        3.离心(4度,10000g,10分钟),上层是醇相,下面是氯仿相,中间蛋白膜层,吸取上层和下层即得到脂肪组织蛋白.
        裂解液成分: 50mM Tris-cl ,2mM EDTA
        抽提液: 2倍体积的氯仿加上1倍体积的甲醇即可

        疑问：1、中间的蛋白膜层，要用什么重新溶解？

                    2、所用的Tris-cl需要调多少的pH

二、将组织先碾磨，用7%的TCA沉淀蛋白，然后用丙酮洗3遍，晾干后得到小块的蛋白沉淀，然后溶解在裂解buffer里，可以用超声助溶。

三、冰浴中用玻璃匀浆器上下匀浆共15次，匀浆置于ep管，4℃，15000r/min，1h，吸上清

        每1mg样品加2ul裂解液

        裂解液：9mol/L，4%CHAPS，65mmol/L DTT

希望各位大神的解答，非常感谢。