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sigma DNase I 货号D5025-15kU Type IV(冻干粉)用前怎么配制?

最后编辑于 2022-10-09 · IP 北京北京
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这个帖子发布于 9 年零 163 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

请教各位大牛老师们:
       我专业不是分子生物学的,但要做些相关实验:用DNase I 来提纯LPS(脂多糖),在这里请教大牛老师们一些弱弱的问题,如下:
       已购得sigma公司国内分装的 DNase I 1支,货号D5025-15kU,Type IV(冻干粉),请问:
                 1、一般用什么溶解?想要50vg/ml的浓度怎么配制?
                 2、“活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA”   活性检测条件是什么意思,干嘛用的?其中的Tris-HCl、MgSO4、CaCl2间没有比例关系吗?就是各试剂要加多少体积?
                 3、“酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol”,其中包括的3种试剂之间的比例是多少,总不能随便加吧?哈哈。
                 4、“Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2”,当我需要用DNase时,我要把酶储存液去除,再放上这个Reaction Buffer才能用吗?这具体是怎么操作的?





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