sigma DNase I 货号D5025-15kU Type IV(冻干粉)用前怎么配制?
请教各位大牛老师们:
我专业不是分子生物学的,但要做些相关实验:用DNase I 来提纯LPS(脂多糖),在这里请教大牛老师们一些弱弱的问题,如下:
已购得sigma公司国内分装的 DNase I 1支,货号D5025-15kU,Type IV(冻干粉),请问:
1、一般用什么溶解?想要50vg/ml的浓度怎么配制?
2、“活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA” 活性检测条件是什么意思,干嘛用的?其中的Tris-HCl、MgSO4、CaCl2间没有比例关系吗?就是各试剂要加多少体积?
3、“酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol”,其中包括的3种试剂之间的比例是多少,总不能随便加吧?哈哈。
4、“Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2”,当我需要用DNase时,我要把酶储存液去除,再放上这个Reaction Buffer才能用吗?这具体是怎么操作的?