【求助】CoIP拉出来目的条带总是很弱

本人做CoIP快半年了，虽然每次能够把条带拉下来但是拉出来的条带总是特别弱，看文献上的Coip条带都很强的，做了不同分子的IP，都是特别弱，不知道什么原因，特此请教一下大家~我一般做IP使用的是大Dish（直径60mm），A质粒转10ug，B质粒转10ug。24h后收细胞裂解，加裂解液1ml, 分40ul做Input，460ul加mIgG，500ul加A蛋白抗体过夜，再加珠子3h，再洗珠子，煮样上样。