【求助】BCA法蛋白定量不准
我用BCA法测定蛋白浓度做WB,因为我每次测蛋白都不准,导致上同样质量的目的蛋白内参都不一致,实验室老师说应该让所测得的目的蛋白浓度的OD值在0.2-0.3之间才比较可信,超过这个范围都是不准的,但是我也不知道多少细胞该加多少裂解液,所以这一次同一个蛋白我做了1:10,1:20,1:40三个浓度梯度去测量,标准曲线R方是0.9931,理论上应该还是不错的,结果三个梯度的OD分别是0.401,0.311,0.255,算出的终浓度居然是4000多,6000多,8000多ug/ml,现在不知道该信哪个值了,到底该拿哪个浓度去算上样量呢?
最后编辑于 2015-07-25 · 浏览 3.8 万