【求助】是咪唑的问题吗?
亲们,我用FPLC过镍柱纯化带有his-tag的目的蛋白,在用0-1M咪唑冲洗的时候,冲100分钟,随着咪唑的增加,出现的是一个坡形的图(最后冲到1M咪唑的时候会达到1000mU(这个单位不知道用的对不对,就是紫外吸收的大小哈)),偶尔某处会有很小很小的凸起,电导也会偶尔发生变化。师兄说那是咪唑不纯,整个都是咪唑的峰,让我收电导发生变化时候的蛋白。想请问大家在纯化的时候图都是什么样的啊?大家都是怎么收的啊?小妹不胜感激!!!
亲们,我用FPLC过镍柱纯化带有his-tag的目的蛋白,在用0-1M咪唑冲洗的时候,冲100分钟,随着咪唑的增加,出现的是一个坡形的图(最后冲到1M咪唑的时候会达到1000mU(这个单位不知道用的对不对,就是紫外吸收的大小哈)),偶尔某处会有很小很小的凸起,电导也会偶尔发生变化。师兄说那是咪唑不纯,整个都是咪唑的峰,让我收电导发生变化时候的蛋白。想请问大家在纯化的时候图都是什么样的啊?大家都是怎么收的啊?小妹不胜感激!!!