sos:我要用离子交换方法纯化一真核表达的蛋白，请教如何纯化

我用真核细胞表达了一种蛋白，先前是用亲和层析纯化，但杂带较多，我现在想在亲和层析前先用离子交换预纯化一次，然后再用亲和层析纯化。由于我没有真核细胞纯化的经验，请教各位高手，破碎细胞时应选用何种缓冲液，用什么方法破碎细胞，另外在纯化时应注意什么问题，如何才能不影响后面的亲和层析，请不吝赐教，小弟万分焦急！在此先谢了。