【求助】最近做的细胞膜蛋白免疫荧光 结果直接影响到毕业啊 请高手指点一二
细胞未通透,分别采用和未使用多聚甲醛固定,一抗分别摸索过过夜4度和4度一小时,然后孵荧光二抗,但是结果是胞内胞外全部都是荧光,真的快崩溃了。也曾想过是否普通的荧光倒置显微镜分辨率低才倒置看着是一片,但是由于激光共聚焦使用不方便,荧光样品放在4度第二天才拿激光共聚焦看,但是还是一片,不知道是不是时间久了。有谁做成功的,就是膜外一圈荧光,细胞内一点都没的,求成功的高手给我一份具体的操作步骤以及该注意的地方。我将感激不尽~
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2598