dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

【求助】CaCl2法包装lentivirus

外科医师 · 最后编辑于 2022-10-09 · IP 美国美国
3047 浏览
这个帖子发布于 12 年零 346 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近我在包装lentivirus,我试了不同的细胞(293t/293ft),不同的包装系统(2代,3代),和不同的转染方法(lipo2000,CaCl2),最后觉得还是293ft,3代包装系统,用氯化钙法转染比较合适。我用了10cm板做了一次,收集了48,72,96小时的midium大约30ml,离心后用300ulPBS溶解,测滴度可以到10的6次方。现在用5个15厘米板做,希望能提高病毒滴度。之前用1.5cmEP管的时候没发现DNA/Cacl2有浑浊,今天用50mlEP管,发现加完DNA和CACL2和HEBS后,变成轻微的乳白色,不知道这是不是正常的,加到细胞上后,用显微镜可以看到一些黄色的团块状的,不知道这是不是大块的沉淀,据说很影响转染效率,希望有经验的前辈指教一下,谢谢

img


6 1 点赞

全部讨论(0)

默认最新
avatar
6
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部