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【求助】用噬菌体展示筛选卵巢癌细胞,测滴度时未出现蓝斑

最后编辑于 2022-10-09 · IP 浙江浙江
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这个帖子发布于 12 年零 354 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位前辈,本人刚刚接触噬菌体展示技术,试剂盒是购自NEB公司,参考别人的文献做了三次淘洗,结果每次测滴度时出来的都是透明的菌斑,均未出现蓝斑,然后用噬菌体原液试过,也是这样的结果,各种液体的配制如下:



LB+Tet平板:

10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,5g NaCl,琼脂15g,加去离子水至1L,用5mol/L NaOH调节至7.2-7.6,高压灭菌,冷却到70℃后加入四环素悬液1ml铺制LB+Tet平板,4℃暗处保存,顶层胶:10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,5g NaCl,琼脂糖7g,加去离子水至1L,高压灭菌,分装于50ml离心管,室温保存,用时微波炉溶解,IPTG/Xgal培养液:混合0.125g IPTG和0.1g Xgal于2.5ml二甲基甲酰胺中,0.22um孔径的滤膜过滤除菌,分装,溶液储存于-20℃。希望各位大侠指教指教,非常感谢!!附上一张结果照片

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