【求助】求教BSP扩增问题

有没有前辈指导下我做BSP？最近做BSP一直没有扩增出产物，用的酶还是比较好的invitrogen的PfxDNA聚合酶，体系也是酶提供的体系。50微升体系如下：
10*Pfx扩增缓冲液 5ul
10mMdNTP混合液 1ul
50mM MgSO4 1ul
上下游引物 1.5ul
模板 1ul
Pfx DNA 聚合酶 0.5ul
水 补足50ul
这个体系还有PCRx增强缓冲液，从1*到3*都试过，Mg2+浓度也梯度试过，温度梯度试过，还是没有扩增出产物。之间有换过引物，都没有扩增出。现在请教下园子了的大虾们要怎么做呢？是不是做BSP PCR的缓冲体系有什么特殊的吗？有做过的赐教下！不甚感激！
PCR条件按照说明书条件操作（自己适当延长了各步的时间）
94℃5min 94℃ 30s 55℃30s 68℃30s （35c）68 10min。两步法也试过：94℃5min 94℃ 30s 68℃1min （35c）68 10min。都木有产物，是体系问题还是PCR扩增条件问题？产物基本上在200bp~300bp之间。