【求助】甲基化质粒
现在在做一个基因是否受甲基化的调控,我构建了两个质粒,一个是未甲基化的调控片段构建的载体。我试图将其用SSSI甲基化酶甲基化后构建甲基化质粒。然而我用甲基化酶作用后,用MluI内切酶切开,鉴定后发现甲基化的质粒只占10%,然后将酶切后的质粒(切散的+甲基化的完整质粒)转化XL10-GOLD菌株,提取质粒后发现都可以用酶切开,即全部都变成去甲基化的质粒了。问题可能在哪里?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3015
现在在做一个基因是否受甲基化的调控,我构建了两个质粒,一个是未甲基化的调控片段构建的载体。我试图将其用SSSI甲基化酶甲基化后构建甲基化质粒。然而我用甲基化酶作用后,用MluI内切酶切开,鉴定后发现甲基化的质粒只占10%,然后将酶切后的质粒(切散的+甲基化的完整质粒)转化XL10-GOLD菌株,提取质粒后发现都可以用酶切开,即全部都变成去甲基化的质粒了。问题可能在哪里?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3015