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【求助】细菌单杂交文库构建

最后编辑于 2022-10-09 · IP 美国美国
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这个帖子发布于 14 年零 359 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我按照发表在nature technology上的protocol 构建细菌单杂交文库。首先需要将pH3U3载体用NotI&AscI双切,再把随即片断克隆到这上面来。我在梅切这步就麻烦了,这个ph3u3是低拷贝数质粒,提的量总不理想。其次NotI&AscI双切后总是不干净,空载体一联接转化总会有很高的背景。请问高手们有无同样的经历?这两个酶怎么才能切干净?谢谢了

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