【求助】HIS融合蛋白表达 出现无法解释现象 请高人帮忙

我用的是pet-20b(+)载体，构建了一个融合蛋白SCFV-OVA，这个载体上有6HIS标签，这样就会形成SCFV-OVA-HIS的融合蛋白 构建成功后，进行了测序，序列完全正确，结果在BL21(DE3)PLYSs里表达，用了各种条件 都出现一个相同现象，就是我用anti-ova抗体检测 在75KD左右就会出现一个特异性条带，正好和预测的SCFV-OVA-HIS融合蛋白分子量相当，但用 anti-his抗体检测 什么都检测不到（这个抗体我已经用其他的his融合蛋白测试过，没问题）原因是什么呢 为什么用anti-his抗体检测不到呢，我看序列了 这三个蛋白是完全融合的 中间没有终止密码子呀
经过这段时间摸索，基本可以确定，表达的大部分的蛋白被细菌产生的蛋白酶降解成两个片段SCFV和OVA-HIS 两个片段，不知道该如何避免呀 请高人指教 我裂解时加了蛋白酶抑制剂 难道是过期了 或者是蛋白表达过程中就已经被降解了吗