【求助】急，急！向大侠求助关于流式出峰问题

最近我做RAW264.7细胞株表面CD54和CD86表达情况，可是总是结果不好，现将我的问题陈述如下：急求大侠能够援助，不胜感激！
RAW264.7细胞株是鼠源巨噬细胞系，我用的抗体是PE标记的抗小鼠CD54和抗CD86抗体！机器是贝克曼quanta sc.      

具体步骤如下：
1.收获细胞，转移到离心管中，常温1000rpm ,10mim离心。
2.弃掉上清，然后每管加入4ml PBS，重悬细胞，再次离心，1000rpm，10min,弃上清。
3.加入300微升PBS重悬细胞，平均分到3个EP管中，每管100微升。
4.其中一管加抗CD54，一管抗CD86，室温孵育30分钟，一管PI染色测活细胞。
5.半小时后每管补加300微升PBS，4摄氏度，2000rpm,5mim,弃掉上清。
6.300微升PBS重悬，过300目滤网，上机检测。
结果如图所示，请教高手给予指点。
荧光检测采用FL2通道，488nm,激发。
先上裸细胞设门，再上同型对照，调节电压。