【求助】如何降低免疫组化背景？？？

请问各位，最近我的免疫组化总是背景深染，以前做出来背景着色比较浅，可是最近老是有深染的背景，一抗同样的浓度，同样的孵育时间，二抗和HRP--链霉卵白素液处理方法也和以前一样，结果就是有背景。很奇怪。我用的是即用型试剂盒。（最近改用浓缩试剂盒）
另外，我还用BSA稀释一抗，希望降低背景，结果还是不能满意。
还有如下问题：
1.是不是血清封闭时间过长容易导致深染背景？
2.显色较慢是什么造成的？？？
3.PBS的PH值改变了也易造成背景？因为我配制的PBS估计有2个周了，有文献显示里面滋生细菌会影响显色。
请各位指点一下，谢谢！！！