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【求助】目的蛋白趋势正确,而actin却屡次不齐

最后编辑于 2022-10-09 · IP 北京北京
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这个帖子发布于 16 年零 103 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
这周做大鼠肝脏CYP2E1和3A的western,突然遇到了让我百思不得其解的问题。目的蛋白的趋势跟预计结果相符(药物诱导组表达量高于正常对照组),而作为内参的actin 却是正常组条带远远浓于诱导组!
开始我以为是strip 的原因,或者是跟抗体孵育的时候没放平,就又跑了一遍胶,专门做actin 。上样、转膜、孵育的时候都很小心可是出来的结果还是那样:正常对照组actin远浓于诱导组。要说是我蛋白定的不匀吧,目的蛋白挺好的呀。真是百思不得其解,希望得到指教。附上我的图。顺便说一下,我能保证照ECL的时候没放反。
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