【求助】原代乳小鼠心肌细胞培养求助，急。。。。

在园子里拜读了关于心肌细胞培养的很多帖子，受益匪浅，感谢。。。
最近我在养乳鼠心肌细胞（小鼠）时始终没有满意结果，真是寝食难安。。。煎熬。。
能否请大家耐心看完我的问题，并提宝贵意见，万分感谢。。
目前碰到的问题：
1.细胞数量少，我现在已经用到10只小鼠每次，总共可消化下4×10的5次方细胞，我用的是转子离心消化，不知道这个数量是否偏少
2.最大的问题是细胞活力不好，细胞在差数贴壁后一两天开始出现大批细胞死亡，高倍镜下可看到许多细胞碎片（发黑），而且有些碎片会在原地做类似布朗运动，刚开始是怀疑细胞污染，可消化几次都是这样，且培养基没混作，这些小东西增多也很慢，最后考虑是细胞碎片，或者是传说中的纳米细菌，呵呵。
这是我的步骤
取心脏---放冷PBS---洗涤---放无血清DMEM---剪碎（剪约200来次，1立方毫米左右）---弃去无血清DMEM---加0.2%胰酶---转3分钟（100转每分左右）---弃去---再加胰酶---转4分钟---吸取胰酶到20%血清DMEM---再加胰酶---转4分钟---吸取加入前述20%血清DMEM---离心1800，8分钟---放入小培养皿2小时
因为消化两次的胰酶就离心一次，所以消化8次，离心了4次，然后差数贴壁后又混在一起加到96孔板里（之前加了BRDU，BRDU之前测了PH值为8.0.感觉问题不大）
不知道我的方法是不是存在什么问题？请大家提宝贵意见。
万分感谢！！