A7R5细胞培养攻略

我之前从师门拿了冻存细胞和几皿活细胞，传代一直不长，养不好，见前贴子。在园子里问了好多人也没有结果。狠狠心在细胞商那花1350元买了一瓶活的，现在分享细胞培养说明，按照说明书培养，完全没问题。

不要心疼钱，我养了2个月没找出问题，浪费的是自己的时间。后来买了新细胞，按照说明书用新的培养体系，长得很好。有时候师兄师姐的经验也不是正确的，他们细胞状态不好不自知，用的正常普通培养体系，以为就是那样的。到处都是坑啊，看不少人求细胞，其实不贵，一千多，老板不会不给报的。大家加油！

2022-9-22更新

买了新细胞还是养不好，前三代挺好的，3天传代，三代后开始长小黑点，增长慢，形状奇怪，各种搜索后，怀疑支原体污染，用同个实验室的一测，果然是。

蓝紫色阴性，天蓝色阳性。所以用了支原体清除剂拯救，效果立竿见影，传代开始用，细胞形态恢复，小黑点没了，背景很干净，增殖速度恢复正常，现在是3-4天传代。

所以同志们注意一下看不见的支原体污染。

另：细胞用高糖DMEM没有用低碳酸氢钠培养基长得快。低NaHCO3培养基1.5g/L，价格贵，我是买普诺赛干粉DMEM高糖培养基，加1.5gNaHCO3自己配的。用着挺好，160块钱可以配5L。