【求助】pcr时有时无

最近比较郁闷，pcr像是跟我开玩笑似的。我是一次做10管，竟然间断出现10个产物全无的现象，就是什么条带都没有，特别干净。我咨询后别人说可能是分装前混合产物没有混匀，后来混匀时间增长，但还是没有。又有人告诉我可能是试剂失效或含有了抑制物。于是我把buffer mg ddh2o统统换过了，引物也换过了，扩出来的特别好。但是只做了2次，第3次又出现了这个现象。应该不是试剂的问题了，因为试剂刚刚用了2次。请各位老师帮我分析原因。